KLORAMFENIKOL

Pendahuluan

Kloramfenikol merupakan antibiotik spektrum luas. Kloramfenikol berhubungan dengan gangguan darah yang serius sebagai efek yang tidak diinginkan sehingga harus disimpan untuk pengobatan infeksi berat, terutama yang disebabkan oleh Hemofilus influenza dan demam tifoid. Suspensi lemak sebaiknya disimpan dalam epidemik meningitis meningokokus.

Antibiotik adalah segolongan senyawa, baik alami maupun sintetik, yang mempunyai efek menekan atau menghentikan suatu proses biokimia di dalam organisme, khususnya dalam proses infeksi oleh bakteri. Literatur lain mendefinisikan antibiotik sebagai substansi yang bahkan di dalam konsentrasi rendah dapat menghambat pertumbuhan dan reproduksi bakteri dan fungi. Penggunaan antibiotika khususnya berkaitan dengan pengobatan penyakit infeksi, meskipun dalam bioteknologi dan rekayasa genetika juga digunakan sebagai alat seleksi terhadap mutan atau transforman. Antibiotika bekerja seperti pestisida dengan menekan atau memutus satu mata rantai metabolisme, hanya saja targetnya adalah bakteri.

Berdasarkan sifatnya (daya hancurnya) antibiotik dibagi menjadi dua:

 1. Antibiotik yang bersifat bakterisidal, yaitu antibiotik yang bersifat destruktif terhadap bakteri.

2. Antibiotik yang bersifat bakteriostatik, yaitu antibiotik yang bekerja menghambat pertumbuhan atau multiplikasi bakteri.

Antibiotik yang menghambat sintesis protein. Yang termasuk ke dalam golongan ini adalah Macrolide, Aminoglycoside, Tetracycline, Chloramphenicol, Kanamycin, Oxytetracycline.

a)      Macrolide, meliputi Erythromycin dan Azithromycin, menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara berikatan pada subunit 50S ribosom, sehingga dengan demikian akan menghambat translokasi peptidil tRNA yang diperlukan untuk sintesis protein. Peristiwa ini bersifat bakteriostatis, namun dalam konsentrasi tinggi hal ini dapat bersifat bakteriosidal. Macrolide biasanya menumpuk pada leukosit dan akan dihantarkan ke tempat terjadinya infeksi. Macrolide biasanya digunakan untuk Diphteria, Legionella mycoplasma, dan Haemophilus.

b)      Aminoglycoside meliputi Streptomycin, Neomycin, dan Gentamycin, merupakan antibiotik bakterisidal yang berikatan dengan subunit 30S/50S sehingga menghambat sintesis protein. Namun antibiotik jenis ini hanya berpengaruh terhadap bakteri gram negatif.

c)      Tetracycline merupakan antibiotik bakteriostatis yang berikatan dengan subunit ribosomal 16S-30S dan mencegah pengikatan aminoasil-tRNA dari situs A pada ribosom, sehingga dengan demikian akan menghambat translasi protein. Namun antibiotik jenis ini memiliki efek samping yaitu menyebabkan gigi menjadi berwarna dan dampaknya terhadap ginjal dan hati.

d)     Chloramphenicol merupakan antibiotik bakteriostatis yang menghambat sintesis protein dan biasanya digunakan pada penyakit akibat kuman Salmonella.

Sejarah dan Sumber

Kloramfenikol adalah antibiotik yang dihasilkan oleh Streptomyces venezuelae, oraganisme yang pertama kali diisolasi tahun 1947 dari sample tanah yang dikumpulkan di Venezuela ( Bartz, 1948). Sewaktu struktur materi kristalin yang relatif sederhana tersebut ditemukan antibiotik, antibiotik ini lalu dibuat secara sinTetik. Pada akhir tahun 1947, sejumlah kecil kloramfenikol yang tersedia digunakan untuk mengobati wabah tifus epidemik yang tiba-tiba muncul di Bolivia, dengan hasil yang mencenangkan. Selanjutnya obat ini diujikan pada kasus tifus scrub di semenanjung Malaka dengan hasil yang sangat baik. Pada tahun 1948, kloramfenikol tersedia untuk pemakaian kilinis umum. Namun, pada tahun 1950, terbukti bahwa obat ini dapat menyebabkan kasus yang serius dan diskrasia darah yang fatal. Oleh karena itu, penggunaan obat ini hanya dikhususkan untuk pasien yang mengalami infeksi berat, seperti meningitis, tifus, dan demam tifoid, yang tidak dapat menggunakan alternatif lain yang lebih aman karena terjadinya resistensi atau alergi. Obat ini juga merupakan terapi yang efektif untuk demam bercak Rocky Mountain.  

Biosintesis

Pada siklus hidupnya yang normal, Streptomyces venezuelae akan tumbuh dalam medium yang sesuai dan menghasilkan jumlah sel maximum, setelah itu berhenti pertumbuhannya, dan memasuki fase stasioner, akhirnya diikuti oleh kematian sel vegetatif atau pembentukan spora. Pada stadium ini, setelah sel-sel berhenti mambelah, metabolit sekunder mulai diproduksi. Metabolit sekunder mulai di produksi dalam jumlah besar dan kebanyakan disekresikan ke dalam medium biakan. Kebanyakan antibiotik merupakan metabolit sekunder.

Jalur biosintesis merupakan urutan pembentukan suatu metabolit dari molekul  yang  paling  sederhana  hingga  molekul  yang  paling  kompleks. Pengetahuan  akan  jalur  biosintesis  ini  memungkinkan  untuk  melakukan modifikasi dari jalur tersebut sehingga dapat diproduksi metabolit dalam jumlah yang lebih banyak dan dalam waktu yang lebih singkat, mengetahui struktur metabolit yang dihasilkan, kemudian dapat dilakukan sintesis untuk menghasilkan derivatnya. Jalur yang biasanya dilalui dalam pembentukan metabolit sekunder ada tiga jalur,yaitu:

1.jalur asam asetat,

2. jalur asam sikimat, dan

3. jalur asam mevalonat

Waktu penggunaan jalur biosintesis saat:1. Rendahnya ekspresi dari gen-gen yang mengontrol tahap-tahap penting dari jalur biosintesis 2. Untuk mendapatkan senyawa tertentu yang sangat dibutuhkan dalam suatu  obat.  Dengan  demikian  dalam  jalur  biosintesis  tanaman  tersebut ditambahkan suatu prekursor seperti menggunakan jalur biosintesis triptofan untuk menyediakan prekursor terhadap sintesis hormon auksin (Indole-3-aceticacid/ IAA), fitoaleksin, glukosinolat, dan indole- serta anthranilat yang keduanya merupakan derivat alkaloid.

Biosintesis mengubah senyawa awal menjadi senyawa baru yang lebih bermanfaat dengan pertolongan suspensi sel. Berdasarkan biosintesis, metabolit sekunder dapat diumpankan dengan prazat untuk menjadi produk yang lebih cepat dengan kultur suspensi sel. Prazat dapat merangsang aktivitas enzim tertentu yang terlibat dalam jalur biosintesis, sehingga dapat meningkatkan produksi metabolit sekunder. Selain itu juga senyawa yang dikehendaki dapat ditingkatkan jumlahnya dengan  cara  memanipulasi  media  maupun  dengan  penambahan  senyawa prekursor/prazat, merangsang aktivitas enzim tertentu yang terlibat dalam jalur biosintesis, sehingga dapat meningkatkan produksi metabolit sekunder.

Isolasi

Proses isolasi Kloramfenikol menggunakan metode pemisahan Kromatografi Lapis Tipis pada mikroorganisme Streptomyces venezuelae. Kromatografi lapis tipis dikenal istilah fase diam dan fase gerak.

a.        Fase diam

Fase diam adalah suatu lapisan yang dibuat dari bahan-bahan berbutir-butir halus yang ditempatkan pada lempengan. Sifat-sifat umum dari penyerap KLT adalah ukuran partikel dan homogenitasnya. Ukuran partikel yang biasa digunakan adalah 1- 25 mikron. Adapun macam-macam fase diam adalah silika gel, alumina, selulosa, resin, kieselguhrs, magnesium silikat.

b.        Fase gerak

Fase gerak adalah medium angkut dan terdiri atas satu atau beberapa pelarut. Fase ini bergerak di dalam fase diam karena adanya gaya kapiler. Macam-macam fase gerak antara lain heksana, toluen, eter, kloroform, aseton,etil asetat, asetonitril, etanol, metanol air.

Dalam KLT dilakukan tahapan pengembangan atau elusi. Pengembangan ialah proses pemisahan campuran cuplikan akibat pelarut pengembang merambat naik dalam lapisan fase diam. Jarak pengembangan senyawa pada kromatogram biasanya dinyatakan dengan Rf atau h Rf . Harga Rf antara 0-1. Berdasarkan parameter tersebut KLT dapat digunakan untuk perhitungan kualitatif dalam pengujian sampel.

Mekanisme Kerja

Mekanisme kerja kloramfenikol menghambat sistesis portein pada bakteri dan dalam jumlah terbatas,  pada sel eukariot. Obat ini segera berpenetrasi ke sel bakteri, kemungkinan melalui difusi terfasilitasi. Kloramfenikol terutama bekerja dengan memikat subunit ribosom 50 S secara reversibel (di dekat tempat kerja antibiotic makrlida dan klindamisin, yang dihambat secara kompetitif oleh obat ini). Walaupun pengikatan tRNA pada bagian pengenalan kodon ini ternyata menghalangi pengikatan ujung tRNA aminosil yang mengandung asam amino ke tempat akseptor pada subunit ribosom 50 S. interkasi antara pepdiltranferase dengan substrat asam aminonya tidak dapat terjadi, sehingga pembentukan ikatan peptide terhambat.

Kloramfenikol juga dapat menghambat sistesis protein mitokondria pada sel mamalia, kemungkinan karena ribosom mitokondria lebih menyerupai ribosom bakteri (keduanya 70 S) dari pada ribosom sitoplasma 80 S pada sel mamalia. Peptidiltransferase ribosom mitokondria, dan bukan ribosom sitoplasma, rentan terhadap kerja penghambtan kloramfenikol. Sel eritropoietik mamalia tampaknya terutama peka terhadap obat ini.

Kerja antimikroba.

Kloramfenikol memiliki aktivitas antimikroba berspektrum luas. Galur dianggap peka apabila dapat dihambat oleh konsentrasi 8 µg/ml atau kurang, kecuali N. gonnorhoeae, S. pneumoniae, dan H. influenza, yang memiliki batas MIC yang lebih rendah. Kloramfenikol terutama bersifat bakteriostatik, walupun dapat bersifat bakterisida terhadap spesies tertentu, seperti N. gonnorhoeae, S. pneumoniae, dan H. influenza. Lebih dari 95% galur bakteri gram-negatif berikut ini dihambat secara in vitro oleh kloramfenikol 8,0 µg/ml atau kurang., yakni N. gonnorhoeae, S. pneumoniae, dan H. influenza. Demikian juga, kebanyakan juga bakteri anaerob, termasuk kokus gram-positif dan Clostridium spp, serta batang-batang negative termasuk B. fragilis dihambat oleh obat ini pada konsentrasi tersebut. Beberapa kokus gram-positif aerob, termasuk Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae (streptokokus kelompok B), dan S. pneumonia peka terhadap 8 µg/ml. galur S. aerus cenderung tidak begitu rentan, dengan MIC yang lebih besar dari 8 µg/ml. kloramfenikol aktif terhadap Mycoplasma, Chlamydia, dan Rickettsia..

Penggunaan terapeutik.

Terapi dengan kloramfenikol hanya boleh digunakan pada infeksi yang manfaat obat tersebut lebih besar dibandingkan resiko toksiksitas potensialnya. Jika tersedia obat antimikroba yang sama-sama efektif dan secara potensial tidak begitu toksik dibandingkan kloramfenikol, maka sebaiknya obat tesebut digunakan.

Sediaan Kloramfenikol

Terbagi dalam bentuk sediaan :

1.      Kapsul 250 mg, Dengan cara pakai untuk dewasa 50 mg/kg BB atau 1-2 kapsul 4 kali sehari. Untuk infeksi berat dosis dapat ditingkatkan 2 x pada awal terapi sampai didapatkan perbaikan klinis.

2.      Salep mata 1 %

3.      Obat tetes mata 0,5 %

4.      Salep kulit 2 %

5.      Obat tetes telinga 1-5 %

kelima sediaan di atas dipakai beberapa kali sehari.

Kloramfenikol palmitat atau stearat

Biasanya berupa botol berisi 60 ml suspensi (tiap 5 l mengandung Kloramfenikol palmitat atau stearat setara dengan 125 mg kloramfenikol). Dosis ditentukan oleh dokter.

Kloramfenikol natrium suksinat

Vial berisi bubuk kloramfenikol natrium suksinat setara dengan 1 g kloramfenikol yang harus dilarutkan dulu dengan 10 ml aquades steril atau dektrose 5 % (mengandung 100 mg/ml).

Nama Perdagangan

·         Alficetyn Alficetyn

·         Amphicol Amphicol

·         Biomicin Biomicin

·         Chloromycetin (persiapan intravena)

·         Chlorsig ( tetes mata)

·         Dispersadron C (tetes mata)

·         Edrumycetin 250 mg (kapsul)

·         Fenicol Fenicol

·         Kemicetine (persiapan intravena)

·         Kloramfenikol (tetes mata)

·         Oftan Chlora (salep mata)

·         Synthomycine (Israel, mata dan salep salep kulit)

·         Tifomycine (kloramfenikol berminyak)

·         Unison (salep kulit)

·         Isoptophenicol (tetes mata)

·         Cedoctine (persiapan intravena)

·         Chloramex (salep mata)

Resistensi

Bakteri dikatakan resistensi bila pertumbuhannya tidak dapat dihambat oleh antibiotika pada kadar maksimum yang dapat ditolerir oleh pejamu.

Mekanisme resistensi terhadap kloramfenikol terjadi melalui inaktivasi obat oleh asetil transferase yang diperantarai oleh faktor-R yang menimbulkan ketidakmampuan organisme untuk mengakumulasikan obat sehingga menimbulkan resistensi. Resistensi terhadap P.aeruginosa. Proteus dan Klebsiella terjadi karena perubahan permeabilitas membran yang mengurangi masuknya obat ke dalam sel bakteri.

Beberapa strain D. Pneumoniae, H. Influenzae, dan N. Meningitidis bersifat resisten; S. Aureus umumnya sensitif, sedang enterobactericeae banyak yang telah resisten.

Obat ini juga efektif terhadap kebanyakan strain E.Coli, K. Pneumoniae, dan P. Mirabilis, kebanyakan Serratia, Providencia dan Proteus rettgerii resisten, juga kebanyakan strain P. Aeruginosa dan S. Typhi

TUGAS FARMAKOGNOSI

“ KLORAMFENIKOL “

 

Disusun Oleh :

·        Cania Mithasari             3311091139

·        Dwi Novita W               3311091143

·        Novi Amalia                  3311091145

·        Nunik Setyowati            3311091152

·        Rizka Menawati             3311091153

Kelas C

UNIVERSITAS JENDERAL ACHMAD YANI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

     JURUSAN FARMASI

  CIMAHI 2011

DAFTAR PUSTAKA

Harvey A. Richard.Farmakologi.1995.Widya Medika : Jakarta.

Mardjono Mahar.Farmakologi dan Terapi.1995.Gaya Baru : Jakarta.

Http//:www.scribd.com/kloramfenikol.

Laporan Identifikasi kapang dan khamir

BAB I

PENDAHULUAN

I.1        Prinsip  Percobaan

Pertumbuhan kapang dan khamir dalam media yang sesuai

II.2       Tujuan Percobaan

Mengetahui   jumlah  koloni dan  identifikasi kapang  dan  khamir yang terkandung atau terdapat dalam sample.

BAB II

LANDASAN TEORI

II.1 Teori Dasar

Selain bakteri, di dalam air limbah juga kerap ditemukan pertumbuhan mikrorganisme lain seperti : kapang, khamir dan protozoa dengan jumlah yang lebih terbatas dibandingkan dengan bakteri.

Secara makroskopis, adanya pertumbuhan kapang atau khamir lebih mudah dikenali, walaupun untuk memastikan identitasnya harus dilakukan juga beberapa percobaan yang lebih spesifik. Teknik identifikasi untuk kapang dan khamir yang sering dilakukan dan dapat diandalkan adalah pengamatan makroskopis terhadap pertumbuhannya dan mikroskopis denagn melihat cirri spesifik sporanya melalui percobaan “moist chamber”.

Hasil pengamatan kedunya kemudian dirujuk kepada pustaka, sehingga ditemukan jenis kapang atau khamir yang ditemukan.

II.2 Teori Tambahan

Banyak istilah yang dipergunakan untuk menyebut jamur atau fungi, seperti cendawan, kapang, lapuk atau khamir. Jamur yang berbentuk filament disebut kapang, sedangkan khamir biasanya untuk sebutan yang uniseluler dan yang lebih mencolok penampilannya disebut jamur, misalnya jamur merang, jamur kelentos, dan jamur hijau. Untuk mempermudah menyebut digunakan satu kata nama yaitu fungi. Fungi berasal dari bahasa yunani yaitu mykes yang berarti jamur atau fungi.

Berikut merupakan ciri-ciri fungi :
• Merupakan organisme yang tidak berklorofil, oleh karena itu bersifa heterotrof. Hidup sebagai parasit, saprofit, dan ada pula yang bersimbiosis.
• Bersifat eukarion (mempunyai inti yang sejati), yaitu materi inti dibungkus olah membran inti.
• Ada yang bersel tunggal dan ada pula yang bersel banyak, yang bersel banyak berbentuk benang atau filamen. Berdasarkan sifat tersebut ukuran jamur sangat bervariasi dari yang sangat kecil (mikroskopis) sampai yang berukuran cukup besar (makroskopis).

• Berkembang biak secara vegetatif dan generatif.
• Menyenangi lingkungan yang agak asam, kurang cahaya, terutama di tempat-tempat lembab yang mengandung zat organik. Fungi hidup di dalam tanah, pada tubuh manusia, binatang, atau tumbuhan yang hidup atau mati, bahkan pada pakaian, sepatu, atau makanan.
Fungi yang bersel banyak tubuhnya tersusun dari benang-benang yang disebut hifa, yang berdiameter 5-10 mikrometer. Hifa dapat bercabang-cabang membentuk anyaman yang disebut miselium. Pada beberapa fungi, dinding sel atau dinding hifa mengandung selulosa, tetapi pada umumnya terutama terdiri atas nitrogen organik, yaitu kitin.
Pada umumnya fungi lebih tahan terhadap lingkungan yang kurang menguntungkan dibandingkan dengan mikroorganisme lainnya. Khamir dapat tumbuh dalam kisaran suhu yang luas, fungi saprofit mempunyai optimum 22-30^oC, sedangkan fungi patogen mempunyai suhu optimum 30-37^oC. Beberapa spesies fungi dapat tumbuh pada suhu 0^oC, dengan demikian dapat menyebabkan kerusakan pada bahan makanan yang disimpan dalam lemari pendingin.
Beberapa jenis fungi dapat bermanfaat bagi kehidupan manusia. Manfaatnya antara lain dapat dimakan, sebagai bahan pengolahan makanan, menghasilkan antibiotik, dan sebagai pengurai dalam ekosistem. Tetapi tidak sedikit spesies fungi yang merupakan penyakit, misalnya pada tumbuhan, hewan, dan manusia.

Pengamatan Bentuk Kapang

Kapang merupakan kelompok fungi yang mempunyai filamen (miselium) dan pertumbuhannya pada makanan mudah dilihat karena penampakannya pada makanan yang berserabut seperti kapas , warnanya putih hingga berbagai warna (bila spora sudah tumbuh) tergantung spesies.

Pengamatan pada kapang dilakukan dengan metode Moist Chamber. Caranya adalah pertama membersihkan gelas objek dengan kapas yang sudah diberi alcohol 70% kemudian dikeringkan. Tujuan daripada penggunaan alkohol adalah untuk meminimalisir mikroorganisme lain. Cawan petri dialasi kertas saring. Dalam cawan petri ini diletakkan gelas objek dan kaca penutup. Alat ini kemudian disteril. Kemudian meneteskan media agar PDA sebanyak 2 tetes yang agak melebar sehingga nanti dapat dipotong 1/3 bagiannya, dan didiamkan hingga membeku. Setelah agar membeku potong  1/3  bagian PDA tersebut dengan ose, sisihkan yang 1/3 dan PDA yang digunakan adalah 2/3 bagian. Ambil Rhizopus sp satu ose untuk dilekatkan pada sisi PDA yang telah beku. Pada saat pengambilan kapang dijumpai kesulitan karena kapangnya sulit diambil dan terlelu melekat pada akar. Sehingga kita mendapatkan kapang yang kurang bagus berwarna kehitaman. Mengoleskan vaselin pada 4 bagian sisi kaca penutup dengan bagian yang diberi vaselin tepat diatas agar yang telah ditanami, hal ini bertujuan untuk memberikan suasana aerob dan vaselin berguna untuk penyanggah kaca penutup agar tidak tertempel dengan media agat dan bakterinya. Untuk memberikan suasana lembab, aquades steril diteteskan ke atas kertas saring yang ada didalam cawan petri tadi. Mikrokultur tadi dieramkan selama 2 hari pada suhu kamar karena kebanyakkan kapang bersifat mesofilik dan suhu optimum pertumbuhan untuk kebanyakan kapang adalah sekitar 25-30C. Setelah dua hari kapang diamati di bawah mikroskop dengan pembesaran 10x. Hasil yang didapat adalah kapang  terdiri dari hifa (miselium), berwarna putih , spora, sporangium dan sporangiophora. Namun  tak jarang miselium atau susunan spora menjadi pecah atau terputus sehingga penampakan di mikroskop kelihatan membingungkan.

Pengamatan Khamir

Khamir tergolong fungi uniseluler. Sel khamir mempunyai ukuran yang bervariasi, yaitu dengan panjang 1-5m sampai 20-50 m, dan lebar 1-10. Reproduksi khamir terutama dengan cara perunasan. Dalam pengolahan pangan, khamir banyak digunakan untuk pembuatan roti, bir, wine,vinegar, dan pematangan keju.tetapi khamir juga dapat menyebabkan kerusakan pada sauerkraut, sari buah, dll.

Sulit membedakan antara khamir dengan bakteri pada medium agar, terkecuali kita melihatnya dengan menggunakann mikroskop.

BAB III

METODOLOGI PERCOBAAN

III.1      Alat-alat & Bahan- bahan Percobaan

No.	Nama Alat/ Bahan	Jumlah/ Kelompok
1	Kaca obyek + tutup	2 set
2	Cawan Petri	2 set
3	Tissu	Secukpnya
4	Air suling	Secukupnya
5	Media SDA steril	1 mL
6	Vaselin	Secukupnya
7	Pisau/ cutter	1

III.2      Prosedur Percobaan

1.       Pengamatan Makroskopis

·         Isolate sampel yang telah diperoleh disiapkan dari pertumbuhan koloni pada media SDA. Gambar atau foto yang telah dibuat, kemudian diamati: warna, bentuk pertumbuhan, bentuk spora dan cirri lain yang spesifik.

·         Hasil pengamatan makroskopis dicatat

·         Catatan: Pertumbuhan kapang dapat ditentukan berdasarkan adanya spora seperti benang-benang atau bulu halus, sedangkan pertumbuhan khamir terlihat seperti lendir dan mengkilat.

2.       Pengamatan Mikroskopis

·         Cawan petri disiapkan dan ditempatkan 2-3 lapis tissue didalamnya, kemudian tissue diteteskan dengan air suling sampai kondisi lembab (tidak boleh terlalu basah ).

·         Kaca obyek diletakkan dan tutupnya diatas tissue basah.

·         Cawan petri yang telah berisi tissue lembab, kaca obyek + tutupnya disterilisasi dalam autoklaf.

·         Media SDA steril diteteskan sedikit pada bagian tengah kaca obyek dan dibiarkan menjadi padat.

·         Media SDA padat dibelah menjadi 2 bagian dengan cutter yang telah diflambir.

·         Isolate/ spora kapang atau khamir diletakkan pada bagian belahan tadi.

·         Bagian belahan media ditutup dengan kaca penutup yang telah diolesi vaselin pada ke-3 sisinya. Vaselin diusahakan agar tidak menyentuh spora.

·         Pembahasan  tissue yang menjadi alas kaca obyek dilakukan secara berkala.

·         Mikrokultur ini diinkubasi pada suhu kamar selama 24-48 jam.

·         Hasilnya dilihat dibawah mikroskop

·         Lakukan pencatatan dan pembuatan foto.

·         Kapang atau khamir diidentifikasi dengan cara hasil pengamatan diatas dibandingkan dengan buku rujukan.

BAB IV

HASIL PERCOBAAN

IV.I Data Percobaan

No.	Makroskopis	Mikrokospis
1	Kapang : Keterangan: spora seperti benang-benang/ bulu halus berwarna putih pada kaca obyek	Keterangan: fibrin lebih jelas terlihat. Dan berdasarkan pengamatan yang terlihat dapat diidentifikasikan termasuk jenis jamur dermatofita.
2.	Khamir Keterangan: seperti lendir dan mengkilap berwarna krem	Keterangan: Berdasarkan pengamatan yang terlihat,dapat diidentifikasikasikan termasuk jenis jamur Nocardia asteroids, Nocardia brasiliensis

IV.II PEMBAHASAN

Tahap pertama dilakukan sterilisasi pada cawan Petri yang berisi tissue lembab, kaca objek beserta cover glass di dalam autoklaf pada suhu 121˚ selama 15 menit pemberian tissue lembab disini agar memudahkan pengambilan kaca obyek dari cawan Petri pada sat akan pengecekan secara mikroskop. Tissue lembab disini diumpamakan sebagai lingkungan untuk hidup mikroorganisme kapang dan khamir.

Tahap kedua yaitu pemberian media SDA steril pada bagian tengah kaca obyek dan dibiarkan menjadi padat dahulu. Jika diberikannya sebelum padat dan masih panas, kemudian kapang dan khamir tidak akan tumbuh.

Tahap selanjutnya adalah membelah media SDA padat menjadi 2 bagian dengan banduan cutter yang telah diflambir. Tujuannya agar mikroba yang terdapat di cutter mati dan cutte dalam keadaan antiseptis.

Langkah selanjutnya meletakan isolate/spora kapang/khamir pada bagian belahan tadi menggunakan kawat ose bulat untuk memudahkan penempelan isolate pada media.

Langkah selanjutnya menutup bagian belahan mediadengan cover glass yang diolesi vaselin pada ketiga sisinya, serta mengusahakan  vaselin tidak menyentuh spora. Agar dapat tumbuh dan berkembnag biak, saat pemberian Vaseline tidak perlu terlalu banyak, cukup sedikit saja asal permukaan cover glass menempel dan tidak mudah lepas. Jika terlalu banyak akan menyulitkan pada saat pengamatan mikroskopik.

Kemudian cawan tersebut diinkubasi dalam inkubator suhu kamar selama 3 hari baru bisa diamati secara makroskopis maupun mikroskopis.

Pengamatan secara makroskopis didapatkan pertumbuhan kapang yang ditentukan adanya spora seperti benang-benang atau bulu halus. Sedangkan khamir terlihat seperti lender yang mengkilat bewarna kekuningan. Pengamatan secara mikroskopik dapat dilihat pada mikroskop, terdapat hifa yang tampak lebih jelas dalam kapang.

BAB V

KESIMPULAN

Dari hasil percobaan yang telah dilakukandapat disimpulkan :

·         Identifikasi kapang dan khamir dilakukan dengan pengamatan makroskopis terhadap pertumbuhannya. Dan dalam percobaan ‘moist chamber’ untuk  melihat ciri spesifik sporanya dengan pengamatan mikroskopis.

·         Pada pengamatan makroskopis, pertumbuhan kapang dapat ditentukan berdasarkan adanya spora seperti benang-benang / bulu halus, sedangkan pertumbuhan khamir terlihat seperti lendir dan mengkilat.

·         Pada pengamatan mikroskopis dalam uji ‘moist chamber’ didapatkan bahwa kapang teridentifikasikan termasuk dalam jenis jamur Dermatofita seperti pada gambar 16. Sedangkan khamir teridentifikasi termasuk dalam jenis jamur Nocardia asteorides, Nocardia brasiliensis. Seperti pada gambar 22 berdasarkan buku pustaka yang tersedia.

DAFTAR PUSTAKA

·         Pelczar, M.J. and E.C.S Chan, Dasar-dasar Mikrobiologi, jilid 1 dan 2, terjemahan Ratna Siri Hadioetomo dkk. , UI-Press, Jakarta, 2005

·         http://renataemily.wordpress.com/  (pukul 17.30)

·         Ketchum, Paul A., Microbiology, Concepts and applications, John Willey and Sons, Singapore, 1988.

LAMPIRAN

1.       Apakah perbedaan makroskopis kultur kapang dan khamir ?

Jawab : Kultur kapang adanya spora seperti benang – benang atau bulu halus, sedangkan khamir adanya lendir yang mengkilat

2.       Ingatkan saudara kondisi optimal pertumbuhan yang diperlukan oleh kapang dan khamir ? Jelaskan dengan singkat.

Jawab : Kapang di inkubasi pada suhu 20 – 250C selama 5-7 hari, sedangkan khamir 30-350C selama 3 hari.

3.       Apakah fungsi tissue lembab pada percobaan ‘ moist chamber’?

Jawab : Untuk merekatkan cawan petri dan kaca objek pada saat disterilisasi dan di inkubasi, agar cawan petri dan kaca objek tidak bergeser.

4.       Bagaimanakah cara sterilisasi cawan petri yang berisi tissue dan kaca obyek?

Jawab :

a.     cawan petri yang tidak steril disiapkan, kemudian dilapisi tissue 2-3 lembar. Tissue tersebut dibasahi dengan aquadest sampai semua permukaan tissue lembab (tidak boleh terlalu basah)

b.     kaca obyek beserta cover glass diletakkan di atas tissue basah.

c.     cawan petri yang sudah berisi kaca obyek di atas permukaan tissue basah tersebut dibungkus dengan kertas sampul lalu disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121˚C

5.     dari percobaan ‘moist chamber’, dapatkah saudara bedakan ciri pertumbuhan kapang dan khamir?

Jawab :

Kapang merupakan kelompok fungi yang mempunyai filamen (miselium) dan berserabut seperti kapas , warnanya putih hingga berbagai warna (bila spora sudah tumbuh) tergantung spesies.

Khamir tergolong fungi uniseluler. Sel khamir mempunyai ukuran yang bervariasi, yaitu dengan panjang 1-5m sampai 20-50 m, dan lebar 1-10. Penampakan yang terlihat khamir itu berlendi

PARAMORE

 

BRAND NEW EYES

Careful (download here)

Brick By Boring Brick (download here)

Feeling Sorry (download here)

Misguided Ghosts (download here)

Playing God(download here)

OST TRANSFORMER 3

Monster (download here)